干货分享|外泌体试剂盒常见问题解答

 

常见问题 问题解答
磁珠法、沉淀法和柱式法有什么区别? 三者的差异取决于下游的应用

①磁珠法提取获得的目的产物会更纯一点,用于后续下游实验检测时结果会更好看,检测图谱什么的会更均一。

②沉淀法检测快、成本低,操作比磁珠法更简单一点,如果是做验证性的实验,可以用沉淀法。

③柱法就是需要对样本进行浓缩,可以用于粗分离后外泌体的再纯化,是定位于精细分离纯化的,产物特点是纯度会高一点。

④三款产品,对外泌体均能够实现外泌体的有效分离提取,在没有办法确定是否含有外泌体时,可以采用沉淀法试剂盒进行初步判断;如果已经有其他家或其它方法能够提取到外泌体,但是检测不出产物,可以考虑更换或者联合适用磁珠法;如果是在本沉淀试剂盒提取后,经过检测确定纯度不够或者有杂蛋白残留是可以考虑进一步使用柱式法进行提纯。

磁珠偶联的抗体是什么,抗体的种属和克隆类型是什么? 偶联抗体是混合抗体,该抗体主要与膜上磷脂特异性结合;
鼠源的重组抗体。
外泌体提取试剂盒比超离心效果怎么样? 超速离心纯度低,超离后由于离心力很大,沉淀团块会比较结实,吹散时间会比较长,电镜对比会有部分碎片颗粒。试剂盒的纯度高,操作简单,不需要设备,容错率低,最重要是提取的目的产物外泌体完整度会更高,实验过程可以采集更好的数据。
试剂盒是提取试剂盒还是在粗离的基础上纯化? 是提取试剂盒,也是可以作为粗离后的纯化试剂盒使用。
外泌体提取试剂盒能用于具有细胞壁的生物吗,比如真菌、细菌、植物、微生物? 本试剂盒已经成功提取过牛奶、血浆、培养基上清、血清中的外泌体,但未成功提取植物细胞外泌体,因此提取实验不建议去提有细胞壁的。一是可能是这一类样本本身含量就少,最后提取效率非常低,不能满足后续实验需求;二是可能细胞壁本身的原因,导致与试剂盒中的磁珠不能结合。细菌等微生物的外泌体理论上是可以提取的,该实验未进行验证,也欢迎客户尝试补充。
适用的产品类型有哪些,血清、血浆、脑脊液这种生物体液能做吗? 已经测试过的样本有血液、血浆、培养基、牛奶(奶粉)。
脑脊液预处理可能需要注意把碎片杂质处理好。
一个试剂盒大概能提多少次50毫升? 亲和磁珠法5T是5次(50毫升),沉淀法50mL规格是2次(50毫升),其中50 ml规格沉淀法试剂盒最大提取体积可以达到200 ml,但并不局限于此,若待提取外泌体的浓度较高,可以进一步降低沉淀试剂的使用比例,推荐试剂与待提取液在1:2~1:8间进行调整优化。
细胞外泌体,从细胞裂解液还是哪个里面提取出来的比较多? 对成功提取实验汇总,发现干细胞培养上清中外泌体是相对较多的,本试剂盒实验条件有限,样本容量有限,具体需结合文献参考或实际进行测试。
提取出来的外泌体,可以放在-80进行保存吗? 可以放,短期冻存是不影响实验检测,但尽量冻存前分装好,忌反复冻融,建议现用现提。

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