一、产品的介绍
ACE rProtein A/G Magnetic IP/Co-IP Kit 是一款能够高效完成免疫沉淀（IP）及免疫共沉淀（Co-IP）实验的试剂盒。其包含高性能 rProteinA/G MagPoly Beads，能够实现快速便捷的磁性分离。另外试剂盒内经过优化的缓冲液，为免疫沉淀实验提供了良好的反应条件，增强了免疫沉淀实验的稳定性。聚合物磁珠的配体是重组蛋白 A/G（约 14 kDa），同时拥有蛋白 A 和蛋白 G 的 IgG 结合结构域，具有更广的抗体亚型结合范围。试剂盒的洗脱方式多样，既可以用低 pH 的洗脱液将免疫复合物从蛋白 A/G 磁珠上洗脱，也可以使用电泳上样缓冲液以变性条件洗脱免疫复合物，直接进行后续检测分析。
二、 产品组分
本产品可广泛应用于细胞裂解物、细胞分泌上清、血清、腹水等样品中抗原的免疫沉淀反应，具体组分见表 1。
| 组分名称 | 规格（10 T） | 规格（50 T） |
| rProtein A/G MagPoly Beads | 200 μL（10 mg/mL） | 1 mL（10 mg/mL） |
| Lysis/Washing Buffer(5×) | 10 mL | 25 mL*2 |
| Lysis/Washing Buffer Enhanced | 100 μL | 500 μL |
| Elution Buffer | 500 μL | 1 mL*5 |
| Neutralization Buffer | 2 mL | 2 mL |
表1.rProtein A/G Magnetic IP/Co-IP Kit产品组分
三、产品特点
①目的蛋白的率高；
②条带干净背景低；
③操作简单，使用方便；
④最快1h完成免疫沉淀实验；
四、操作步骤
1.缓冲液的准备
可使用试剂盒准备的缓冲液，也可根据实际情况配制不同的缓冲液体系。Lysis/Wash Buffer(5×) 在使用前请稀释至并标记为 1×Lysis/Wash Buffer，另根据需求，补加终浓度为 0.1%-1% 的 Lysis/Wash Buffer Enhanced，标记为 1×Lysis/Wash Buffer(Enhanced)。所有缓冲液在使用前建议用 0.22 μm 或者 0.45 μm 滤膜过滤，稀释后的缓冲液建议 4℃保存，若试剂浑浊，请立即丢弃。
2.样品准备
包含贴壁细胞的裂解和悬浮细胞的裂解（详细裂解过程见产品说明书），裂解完毕后， 将上清转移到一个新管中，进行蛋白浓度测定及后续实验，标记为细胞裂解样品。
3. 免疫沉淀
抗原、抗体与磁珠的结合顺序可根据实际情况调整，不同的孵育顺序对最终纯度及抗原产量均有影响，以下方案为推荐常用的实验方法。
①磁珠漂洗：需将 rProtein A/G MagPoly Beads充分混匀，加入1×Lysis/Wash Buffer(Enhanced)漂洗。详细操作见产品说明书。
②免疫沉淀：方案一为磁珠先与抗体混合孵育，然后再加入细胞裂解样品进行孵育；方案二将细胞裂解样品与抗体混合孵育，将孵育后的样品加入准备好的磁珠中混旋孵育。详细操作见产品说明书。
③磁珠漂洗：需将免疫沉淀的样品充分混匀，加入1×Lysis/Wash Buffer(Enhanced)漂洗。详细操作见产品说明书。
④洗脱：方案一 低 pH 洗脱；方案二 备选洗脱方法（变性洗脱）；两种洗脱方案均包含捕获抗体及目的抗原，低 pH 洗脱样本中抗体为完整结构，可以用于SDS-PAGE实验、质谱实验，变性洗脱样本中抗体解离为重链、轻链，根据后续实验需求选择洗脱方案。
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