一、注意事项
①当 Solution B 加入到 Solution A 中时，开始可观察到有浑浊产生，搅拌后浑浊迅速消失，得到果绿色的澄清工作液。根据所要检测的样品数量，配制足够体积的工作液。配制好的工作液在室温密闭容器中可稳定保存 24 h。
②该方法不是终点法，孵育完成后，工作液和待测样品混合液仍会继续显色，但室温的显色速率较慢，请在 10 min 内完成所有样品检测，就不会产生明显误差。
③标准方案检测时，如实验条件限制无法进行 37℃孵育，也可选择室温孵育 2 h。
④延长孵育时间或者升高温度会使工作液与待测样品反应颜色变深，在 562 nm 处吸收值变高，影响读数的准确性，降低试剂的检测灵敏度。
⑤增强方案操作不建议在微孔板中进行，因微孔板中样品量较少，加热过程中易挥发，影响检测准确度。
⑥ BCA 试剂盒对各试剂的耐受浓度，请查询我们的网站信息。
⑦不同蛋白用 BCA 试剂盒检测，都会有独特的吸光度反应。通常使用 BSA 作为标准定量未知蛋白的浓度，但如果需要精确定量，请使用高纯度目的蛋白做标准品。其他蛋白相对 BSA 的吸光度系数，请查询我们的网站信息。
二、常见问题及解决方法
| 问题 | 原因分析 | 解决方案 |
| 工作液和样品混合后未显色 | 样品中含有铜离子螯合试剂 | 对样品进行透析、脱盐或稀释处理 |
| 样品显色比预计颜色深 | 样品浓度过高 | 将样品稀释 |
| 空白标准品吸光值正常，标准品和待测样品显示的颜 色比预计值低 | 检测波长不正确 | 在562 nm处检测吸收值 |
| 缓冲液为强酸或强碱，工作液pH被改变 | 对样品进行透析，脱盐或者稀释 | |
| 所有试管（包括空白试管）都呈现暗紫色 | 缓冲液中含有还原剂 | 对样品进行透析或者稀释 |
| 缓冲液中含有巯基 | ||
| 缓冲液中含有生物胺 | ||
| 分光光度计或酶标仪不具备562 nm滤光片 | 采用540 nm-590 nm读数 | 样品在540 nm-590 nm之间的任意波长都可能检测到颜色变化，但灵敏度会降低 |
