干货分享 | FuturePAGE™蛋白预制胶常见问题解答

干货分享 | FuturePAGE™蛋白预制胶常见问题解答插图

01 产品优势

FuturePAGE™蛋白预制胶采用全自动凝胶灌注技术,产品的重复性好,质量稳定。独特的凝胶缓冲配方使蛋白电泳条带更为清晰锐利,更加均匀,分辨率更高。

02 常见问题解答

在WB实验过程中,部分同学不可避免会碰到一些“拦路虎”。

本期,小编汇总过往经验,以助大家顺利完成实验。

问:FuturePAGE™蛋白预制胶尺寸、厚度?

答:胶板约10×8 cm,厚4. 5 mm;胶体约8.5×7 cm,厚1 mm。(测量存在一定误差)

问:FuturePAGE™蛋白预制胶适用电泳槽?

答:天能、伯乐、六一、WIX 。

问:FuturePAGE™蛋白预制胶每个胶孔的最大上样量是多少?

答:11孔胶最大上样量50 μL,15孔胶最大上样量30 μL。

问:FuturePAGE™蛋白预制胶跑胶参数?

答:160 V,45-50 min。电压不超过180 V。

问:FuturePAGE™蛋白预制胶的体系是什么,用什么电泳液?

 答:预制胶为Bis-tris体系,目前使用Mops电泳液。Mops电泳液配方:50 mM Tris,5 0mM Mops,0.1% SDS,1mM EDTA,pH7.8。详细操作可见说明书。

 

03 问题条带解答

干货分享 | FuturePAGE™蛋白预制胶常见问题解答插图1

1.电泳条带跑不下去,指示剂在加样孔内不动

可能原因:底部蓝色胶条没撕    解决办法:撕掉胶板底部蓝色胶条

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2.指示剂偏斜

可能原因:电泳槽漏液    解决办法:调整胶板位置,检查密封条

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3.电泳下端条带发黄

可能原因:①电泳液从变形、损坏的胶板渗入    解决办法:选用合适的电泳槽,确认胶板是否损坏

②外槽电泳液太少,卡在临界点    解决办法:补齐电泳液

③电泳液pH值下降
解决办法:用去离子水重新配置电泳液

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4.蛋白条带拖尾

可能原因:样品溶解不佳或者降解    解决办法:(1)样品加热,离心取上清(2)制备新鲜样品

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5.指示剂呈倒三角状,即两边低、中间高,形成峰顶

可能原因:内、外槽电泳液量不够    解决办法:补满内槽电泳液,外槽电泳液补至2/3高度

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6.指示剂出现弧度

可能原因:底部出口被电泳槽上胶条部分覆盖或者胶板底部没卡紧    解决办法:调整胶板位置,避免底部出口和胶条重合

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7.指示剂条带异常是什么原因导致

可能原因:使用错误的电泳液    解决办法:使用MOPS-SDS Running Buffer

以上就是预制胶使用过程中常见问题及解决方法,如您遇到相同问题,可以按照对应的解决方法进行调整。如在使用过程中,遇到了其他问题,也欢迎您提出宝贵意见,我们将为您提供更加优质的服务。