新品上市 | 蛋白质定量试剂盒

连日来的高温酷暑让同学们实实在在地感受到了这盛夏的滋味。

为了让大家安心、静心的完成实验。小编经过多少个昼夜苦心钻研，蛋白质定量试剂盒上市了~

BCA Protein Assay Kit

 

BCA Protein Assay Kit是目前世界上最常用的两种蛋白浓度检测方法之一。BCA蛋白质定量包括两步反应：首先，二价铜离子(Cu²⁺)在碱性条件下被蛋白质的肽键还原成一价铜离子(Cu⁺)；其次，两个分子的BCA络合一个一价铜离子(Cu⁺)，形成一种在562 nm处有强吸收值的紫色复合物，而复合物的吸收值与蛋白的浓度在一定范围内呈线性相关（如图）。

使用BCA法进行蛋白质定量有以下特点：1.不受蛋白种类的影响，在20-2000 μg/mL浓度范围内有较好的线性。2.表面活性剂对浓度检测的干扰较小。但由于还原剂和螯合剂对反应有阻碍，因此本制品不适用于含有还原剂或者螯合剂的蛋白质样品的定量。

表1是试剂盒的基本组成，我们提供两种检测方案：试管和微孔板。试管方案所需样品量较大（0.1 mL）,但样品和工作液的稀释比例为1:20（V/V），所以干扰物的影响比较小；微孔板方案所需的工作液较少（200 uL），样品体积少（25 uL），但样品和工作液的稀释比例为1:8（V/V），对干扰物的耐受较差。

Bradford Protein Assay Kit

Bradford Protein Assay Kit是根据最常用的蛋白定量方法Bradford法研制而成的即用型定量试剂盒，检测原理是考马斯亮蓝(Coommassie Brilliant Blue)G-250 与蛋白质的碱性和芳香族氨基酸特别是精氨酸(Arg)在酸性介质中结合后，溶液转变为蓝色，最大吸收峰从465 nm迁移到610 nm，并在595 nm处有最大吸收差异，染料颜色的变化与蛋白质浓度成正比。Bradford法优点是快速、简单，灵明度高，染料与蛋白结合过程几乎在2 min内完成，10-20个样品只需20 min左右即可完成，和BCA法相比大大缩短了检测时间。蛋白和染料反应后颜色稳定性良好（持续1 h）。该方法兼容一定浓度的螯合剂和还原剂，但不耐受去污剂。推荐用于样品总蛋白浓度的检测。Bradford法每次实验都必须完成一条标准曲线。如下图：